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        文章詳情

        各種動物外周血血小板分離液試劑盒技術說明書

        日期:2022-06-20 08:14
        瀏覽次數:504
        摘要:各種動物外周血血小板分離液試劑盒 規格: 3×200 mL/kit 保存: 本產品對光敏感,應該室溫 避光儲存,保質期 2 年。無菌開封后,保存于室溫。 組成: 各種動物外周血血小板分離液 200mL 全血及組織稀釋液 200mL 細胞洗滌液 200mL
        各種動物外周血血小板分離液試劑盒
        規格: 3×200 mL/kit
        保存: 本產品對光敏感,應該室溫 避光儲存,保質期 2 年。無菌開封后,保存于室溫。
        組成:
        各種動物外周血血小板分離液 200mL
        全血及組織稀釋液 200mL
        細胞洗滌液 200mL
        操作步驟 :
        1. 取新鮮抗凝全血(EDTA、枸櫞酸鈉或肝素抗凝均可)或者去纖維蛋白血液,用等體積的
        全血及組織稀釋液
        或者 PBS 稀釋全血。
        2. 在離心管中加入至少 5mL 的分離液(當血液的體積大于等于 3mL,加入 2 倍體積分離液,
        但二者的總體積不能
        超過離心管的三分之二,否則會影響分離效果)。
        3. 將稀釋后的血液平鋪到分離液液面上方,注意保持兩液面界面清晰(可以使用巴氏德吸
        管吸取血液,然后將
        血液小心的平鋪于分離液上,因為兩者的密度差異,將形成明顯的分層界面。如果樣品較多,
        加樣的時間較
        長,在離心之前出現紅細胞成團下沉屬正?,F象)。
        4. 室溫,水平轉子 200-250g ,離心 15min(血液的體積越大所需的離心力越大,離心時
        間越長,*佳的分離條
        件需摸索)。
        5. 離心后,此時離心管中由上至下分為四層:*上層為富含血小板的血漿層;第三層為分
        離液層;分離液與血
        漿層之間是白色細胞層;第四層為紅細胞層。
        6. 小心的吸取富含血小板的血漿層到 15mL 潔凈的離心管中,加
        入 10mLPBS 或細胞洗滌液(如果需要得到富含血小板的血漿,
        可直接吸取,不再清洗)。500g,離心 20min。
        7. 棄上清,5mL 的 PBS 或細胞洗滌液重懸血小板,500g,離心
        20min。
        8. 棄上清,重懸備用。
        注意事項 :
        A. 開封前顛倒混勻,本分離液為無菌產品,為延長分離液保存時
        間,請在無菌條件下啟封,避免微生物污染。。
        B. 分離液使用時應始終保持室溫(18℃~25℃),如室內溫度較
        低,可將分離液預熱。4℃或者是溫度較低的條件下離心,分
        離效果差。
        C. 吸取過多的血小板血漿層下層溶液會導致交界處白細胞混雜。
        D. 血液樣本*好為新鮮抗凝血(采血 2 h 以內),避免冷凍和冷
        E. 稀釋血液或洗滌細胞,不可使用含 Ca、Mg 離子的緩沖液及培養液,降低細胞得率及純
        度。
        F. 部分塑料制品(如聚苯乙烯)因其帶有的靜電作用,可能會導致細胞掛壁,影響分離效
        果。
        G. 血液樣本的粘稠度或者是溫度差異,可能會影響分離效果,可以對血液稀釋或者是調節
        離心轉數和離心時間,
        摸索*佳的分離條件。
        H. 不同動物血液在不同比重分離液中的細胞離散系數及細胞帶電不同,用戶在制定分離液
        時應提供所需分離液
        的比重、動物種屬及被分離細胞的名稱。
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